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空间转录组测序

10x Visium

10x Genomics Visium将基因空间表达可视化,,在识别不同细胞群的同时保留空间背景,,,提供了关于组织微环境中细胞功能、、表型和位置关系的关键信息,,,,为基因表达和组织复杂性研究提供了一个新视角。。。

将冰冻组织切片放置在10X Genomics Visium芯片的的捕获区域内,,,,进行HE染色和成像后,,对组织切片进行透化处理,,,细胞内的mRNA释放,,,,从而被芯片上带有oligo-dT的探针捕获,,并且每个探针都带有特异的地址序列,,然后以mRNA为模版进行cDNA合成,,构建文库后进行测序,,,,从而能够获得基因表达的位置信息。。。
 
Visium空间基因表达玻片信息

Visium芯片有4个捕获区域,,,每个区域大小为6.5mm *6.5mm,,,,每个spot直径为55um,,包含数百万个用于捕获的oligo探针序列,,,,相邻两个spot点的中心距离为100um。。。探针序列的结构为:测序引物结合序列,,,16 nt spatial barcoded,,12 nt UMI及30 nt oligo-dT序列。。
 
 
样本起始量与送样建议

组织类型 样本收集
OCT包埋冰冻组织/白片/切片 制备 OCT包埋冰冻组织块,,建议组织大小为长×宽不超过 6.5mm×6.5mm,,,,高度≥5mm;
白片或贴片建议准备6-13 片(10μm 厚度)。。。
封装好用干冰进行寄送。。。。
FFPE包埋组织/白片/切片 石蜡包埋组织封装好后,,4℃进行寄送。。。。
石蜡包埋白片或贴片建议准备6-13 片(5μm 厚度),,,4℃进行寄送。。。
 
注意事项:详细样本准备指南,,,,请联系在线客服。。。
 
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