外泌体研究一站式解决方案

什么是外泌体
？？？

外泌体是由细胞分泌的直径为30~150nm的小囊泡，，，内含来源于细胞相关的蛋白质与核苷酸等生物分子，，
，在细胞交流间起重要作用。。
。具有减少细胞凋亡、
、、减轻炎症反应、
、、、促进血管生成
、、抑制纤维化、、、提高组织修复潜力等重要生物学功能
。。其具有以下特征：

• 典型的“杯托”形态
• 内含的核苷酸包括DNA、、mRNA、、、miRNA、、lncRNA等
• 几乎存在于所有的体液、、、、组织及细胞间隙中
• 几乎所有的细胞都能分泌外泌体
• 不同细胞分泌的外泌体成分不同

外泌体有哪些功能？？

外泌体携带大量特异性的蛋白质（如细胞因子、
、、、生长因子）以及功能性的mRNA、、miRNA等生物活性物质，，，在体内参与免疫应答、、、抗原提呈、、
、
、细胞迁移、、
、、细胞分化、、、
、肿瘤侵袭、、促血管新生等生理过程，，与多种疾病的发生和进程密切相关。。由于外泌体的特殊结构和功能
，
，，使得它具有潜在的应用价值，，一方面可以作为诊断多种疾病的生物指标，，另一方面也可以作为治疗手段，
，，未来有可能作为药物的天然载体用于临床治疗
。
。
。。

如何分离外泌体？？？

外泌体的样本来源主要有细胞培养上清、、血清/血浆、、、尿液、、、、腹水、、
、、乳汁
、、脑脊液
、、唾液、、、滑液等，，其中细胞培养上清、
、、
、血清/血浆、、、尿液是最常见的来源。。如果是使用细胞培养上清，，，要注意细胞培养中一定不能添加FBS。。。
。

外泌体分离方法有很多种
，
，包括超速离心、、、、过滤离心
、
、
、密度梯度离心、、、免疫磁珠和商用试剂盒。
。但是这么多方法中，
，我们通常推荐选用超速离心法进行提取和分离
，
，因为超速离心方法得到的外泌体不管是从得率还是纯度上都比较好。。其他方法的特点如下：

1、、
、
、过滤离心：得率比较低。
。。

2、、密度梯度离心：步骤繁琐，，得率较低。
。。。

3、、免疫磁珠：特异性比较高，，得率较低。。

4、、商用试剂盒：价格高，，
，，效果一般。。
。分离出的外泌体电镜和粒径效果差。。。。

综合以上，，，，超速离心法是目前价格适中、、得率和纯度都能兼得的一种方法
。。。
。

如何鉴定外泌体？
？？？

外泌体鉴定是进一步研究外泌体功能和机制的工作基础。。。目前的鉴定方法主要包括透射电子显微镜（TEM）进行形态学观察、、、、纳米颗粒追踪分析（NTA）进行粒径和密度分析
、、、、用WB进行蛋白标志物的鉴定
。。
。。WB鉴定包括CD63
、、CD9
、、、CD81、、
、TSG101
、、
、Hsp70、、syntenin1等。。

透射电镜图

纳米颗粒追踪分析

WB

如何研究外泌体？？？？

外泌体的研究方向主要包括以下三个方面：

1、、、寻找疾病诊断和预后的分子标志物。。

2、、揭示疾病发病机制，，，从微环境角度解释细胞之间通讯促进疾病发生的原因。。。。

3、、、外泌体作为药物载体，，，实现靶向给药。
。。。

针对寻找分子标志物，，，通常的研究思路如下
：

针对疾病研究，，
，，常见的研究思路如下（以外泌体miRNA为例）：